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CRISPR-CAS9

Origen
1. Bacterias
  1. Metodo de defensa contra infecciones viricas
    1. Destruyen al material genético del virus
  2. Tienen enzimas capaces de distinguir entre el material genético de la bacteria y el del virus
  3. Llenas de repeticiones palindromicas en cierta parte de sus genomas
Aplicaciones
1. Editar
2. Alterar
  1. Genes
    1. ¿Para qué?
      1. Eliminación de enfermedades hereditarias
      2. Crear modelos de animales para estudiar enfermedades
      3. Re-programación de nuestras células para que corten el genoma del VIH.
      4. modificar los genomas de embriones humanos.
      5. Mejorar los alimentos transgénicos
3. Corregir
¿Cómo funciona?
1. Todo comienza con el diseño de una molécula de ARN que luego va a ser insertada en una célula.
  1. Etapas
    1. 2°
      1. Se activan al menos dos mecanismos naturales de reparación del ADN cortado.
        El primero llamado indel hace que, después del sitio de corte aparezca un hueco en la cadena y se inserte un pedazo más de cadena. Esto conlleva a la perdida de la función original del segmento de ADN cortado.
        Un segundo mecanismo permite la incorporación de una secuencia concreta exactamente en el sitio original de corte. Para esto, lógicamente, hemos de darle a la célula la secuencia que queremos que se integre en el ADN.
    2. 1°
      1. El ARN guía se asocia con la enzima Cas9.
        Actúa Cas9 cortando el ADN.
Herramientas implicadas
1. Proteinas
  1. Cas-9
    1. Es una enzima endonucleasa de ADN de ARN guía asociada con un sistema adaptivo CRISPR de inmunidad en algunas bacterias.
2. CRISPR
  1. Repeticiones palindrómicas cortas, agrupadas y regularmente interespaciadas
3. Secuencia PAM
  1. Es una secuencia de ADN de 2-6 pares de bases inmediatamente después de la secuencia de ADN dirigida por la nucleasa Cas9 .
¿Problemas?
1. Éticos
  1. Riesgos de defectos genéticos
    1. Ronocimiento extraordinariamente incompleto que se tiene de los efectos genéticos reales.
  2. Consecuencias imprevisibles a largo plazo
    1. Por ejemplo, el gen corregido se transmite a los descendientes y tiene en ellos efectos que nadie había previsto.
2. Técnicos
  1. La especificidad del ARN guía no es total.
    1. La enzima Cas9 prodría cortar en un sitio que no nos interese.
  2. Cas9 puede cortar sin que esté presente el ARN guía.
    1. Esto se soluciona con enzimas más precisas
3. Ecosistemicos
  1. Los ecosistemas también pueden verse amenazados cuando se liberan en el medio silvestre mosquitos o productos agrícolas modificados genéticamente.

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