ELISA

ELISA

Um dos métodos imunológicos mais usados para quantificar anticorpos e antígenos
1. Nesse método, uma enzima, que reage com um substrato incolor para produzir um produto colorido, é covalentemente ligada a um anticorpo específico que reconhece um antígeno alvo.
2. No ELISA, deve-se selecionar um par de anticorpos, que podem ser monoclonais ou policlonais.
  1. O uso de anticorpos monoclonais resulta em maior especificidade
Dentre os diversos tipos de ELISA, destaca-se o ELISA SANDUÍCHE.
1. Nesse método, o anticorpo de um antígeno particular é, inicialmente, adsorvido no well.
2. Depois, o antígeno (soro, urina ou outra solução contendo o antígeno) é adicionado e se liga ao anticorpo
  1. Finalmente, um segundo e diferente anticorpo ligado à enzima é adicionado
EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS:
1. PLACA DE ELISA
  1. PIPETAS AUTOMÁTICAS
    1. LEITOR DE ELISA
      1. LAVADOR AUTOMÁTICO DE PLACAS
2. Precauções :
  1. Data de validade e estocagem dos reagentes
    1. Processamento e estocagem das amostras
    2. Evitar contaminação e espuma no preparo de soluções
      1. Calibração de pipetas e demais aparelhos e limpeza
  2. Porcedimento para Elisa Sanduíche

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