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PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA
IDENTIFICACION DE
MICROORGANISMOS, TINCIONES Y
MORFOLOGIA MICROSCOPICA D
- al ser los microorganismos trasparentes, se deben
teñir a los microorganismos con compuestos que se
fijen a sus estructuras y les confieran color, estos
compuestos son los colorantes.
- Los resultados de las tinciones y de los cultivos deben combinarse con resultados de pruebas
bioquímicas.
- Para la tinción de las bacterias se pueden utilizar tinciones simples, diferenciales y selectivas
- Las primeras son aquellas en las cuales se utiliza un solo colorante y éste tiñe todo el protoplasma de la célula,
observándose ésta de un solo color uniforme. Las tinciones diferenciales son aquellas en las cuales se utilizan dos
colorantes y generalmente un mordente (compuesto que permite fijar el colorante a un material) que permiten
establecer dos grupos de bacterias, uno que acepta el primer colorante y otro que acepta el segundo colorante, lo que le
da un valor en la clasificación celular (ejemplo: Tinción de Gram y Tinción de Ziehl Neelsen).
- Cuando teñimos una bacteria requerimos hacer un frotis
- es decir requerimos colocar una pequeñísima muestra de una colonia bacteriana o una pequeña
gota de un cultivo líquido, sobre un portaobjetos, extenderla, dejarla secar y fijarla. En este punto
podemos teñir a nuestra bacteria y hacer la observación al microscopio para conocer la morfología
que pueden tener los diferentes organismos. Debido al tamaño de las bacterias, todas las
observaciones se realizan al microscopio con el objetivo de inmersión.
- Las pruebas bioquímicas
- evalúan las propiedades metabólicas de un microorganismo aislado, las cuales son únicas para cada
especie.
- La combinación de pruebas bioquímicas puede utilizarse para determinar el patrón bioquímico del
microorganismo aislado. Esto hace posible la identificación del mismo utilizando un esquema de
identificación. La identificación de un microorganismo es especialmente importante en el área
clínica debido a que, al conocer la identidad del patógeno se puede determinar la susceptibilidad a
algún antibiótico, lo cual es esencial para determinar un tratamiento médico efectivo.
- Existen tres métodos de identificación: a) método convencional; b) sistemas multiprueba y c)
métodos automatizados.
- Existen tres métodos de identificación: a) método convencional; b) sistemas multiprueba y c)
métodos automatizados.
- La combinación de pruebas bioquímicas puede utilizarse para determinar el patrón bioquímico del
microorganismo aislado. Esto hace posible la identificación del mismo utilizando un esquema de
identificación. La identificación de un microorganismo es especialmente importante en el área
clínica debido a que, al conocer la identidad del patógeno se puede determinar la susceptibilidad a
algún antibiótico, lo cual es esencial para determinar un tratamiento médico efectivo.
- evalúan las propiedades metabólicas de un microorganismo aislado, las cuales son únicas para cada
especie.
- Las pruebas bioquímicas
- es decir requerimos colocar una pequeñísima muestra de una colonia bacteriana o una pequeña
gota de un cultivo líquido, sobre un portaobjetos, extenderla, dejarla secar y fijarla. En este punto
podemos teñir a nuestra bacteria y hacer la observación al microscopio para conocer la morfología
que pueden tener los diferentes organismos. Debido al tamaño de las bacterias, todas las
observaciones se realizan al microscopio con el objetivo de inmersión.
- técnica de Gram
- La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de
tinción diferencial empleado en bacteriología para la
visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.
Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram
(1853-1938), que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza
tanto para poder referirse a la morfología celular
bacteriana, como para poder realizar una primera
aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose
bacterias gram positivas a las que se visualizan de color
morado, y bacterias gram negativas a las que se visualizan
de color rosa, rojo o grosella.
- Stern y Stearn los microorganismos grampositivos tienen una
escala isoeléctrica de pH inferior a la de los microorganismos
gramnegativos; y, a base de sus datos experimentales, deducen
las siguientes conclusiones: • Los microorganismos grampositivos
pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez. • Los
microorganismos gramnegativos pueden hacerse grampositivos al
aumentar la alcalinidad. • Los microorganismos de reacción
positiva a los colorantes ácidos pueden hacerse gramnegativos
por aumentar la alcalinidad. • Los microorganismos de reacción
positiva a los colorantes básicos pueden hacerse gramnegativos
por aumentar la acidez. • En la zona isoeléctrica característica de
cada especie es muy escasa la tendencia a retener cualquier
colorante. • Parece estar bien demostrado que las proteínas de las
bacterias no son simples, sino más bien una débil combinación de
sustancias proteínicas con otras lipoideas o grasas. • La materia
grasa extraída de los microorganismos grampositivos difie
- • Teoría de Libenson y Mcllroy Un microorganismo gram
positivo debe presentar una pared celular sana. El mismo
microorganismo, si sufre daño de la pared por una u otra
causa, se vuelve gram negativo. Esto indica la importancia
de la pared para la retención o el escape del colorante.
- • Teoría de Libenson y Mcllroy Un microorganismo gram
positivo debe presentar una pared celular sana. El mismo
microorganismo, si sufre daño de la pared por una u otra
causa, se vuelve gram negativo. Esto indica la importancia
de la pared para la retención o el escape del colorante.
- Stern y Stearn los microorganismos grampositivos tienen una
escala isoeléctrica de pH inferior a la de los microorganismos
gramnegativos; y, a base de sus datos experimentales, deducen
las siguientes conclusiones: • Los microorganismos grampositivos
pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez. • Los
microorganismos gramnegativos pueden hacerse grampositivos al
aumentar la alcalinidad. • Los microorganismos de reacción
positiva a los colorantes ácidos pueden hacerse gramnegativos
por aumentar la alcalinidad. • Los microorganismos de reacción
positiva a los colorantes básicos pueden hacerse gramnegativos
por aumentar la acidez. • En la zona isoeléctrica característica de
cada especie es muy escasa la tendencia a retener cualquier
colorante. • Parece estar bien demostrado que las proteínas de las
bacterias no son simples, sino más bien una débil combinación de
sustancias proteínicas con otras lipoideas o grasas. • La materia
grasa extraída de los microorganismos grampositivos difie
- La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de
tinción diferencial empleado en bacteriología para la
visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.
Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram
(1853-1938), que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza
tanto para poder referirse a la morfología celular
bacteriana, como para poder realizar una primera
aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose
bacterias gram positivas a las que se visualizan de color
morado, y bacterias gram negativas a las que se visualizan
de color rosa, rojo o grosella.
- Cuando teñimos una bacteria requerimos hacer un frotis
- Las primeras son aquellas en las cuales se utiliza un solo colorante y éste tiñe todo el protoplasma de la célula,
observándose ésta de un solo color uniforme. Las tinciones diferenciales son aquellas en las cuales se utilizan dos
colorantes y generalmente un mordente (compuesto que permite fijar el colorante a un material) que permiten
establecer dos grupos de bacterias, uno que acepta el primer colorante y otro que acepta el segundo colorante, lo que le
da un valor en la clasificación celular (ejemplo: Tinción de Gram y Tinción de Ziehl Neelsen).
- Para la tinción de las bacterias se pueden utilizar tinciones simples, diferenciales y selectivas
- Un colorante es un compuesto orgánico que tiene grupos cromóforos y auxocromos unidos a anillos
bencénicos, conformando lo que se conoce como un cromógeno. Los grupos cromóforos son
radicales que le confieren la propiedad de color a los anillos bencénicos. El auxocromo es un radical
que imparte al compuesto la propiedad de disociación electrolítica, permitiendo con esto la fijación
del compuesto a diferentes materiales.
- Los resultados de las tinciones y de los cultivos deben combinarse con resultados de pruebas
bioquímicas.
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