Transformación bacteriana

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Diagrama de flujo laboratorio #13. Biologia celular y molecular 2 UdeA
Fredy Romero Menco
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Fredy Romero Menco
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Resource summary

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  • TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
  • DIA 1
  • DIA 2
  • En un tubo eppendorf de 3 ml colocar alrededor de 200 µl de células competentes Escherichia coli  DH5α
  • Adicione 20 µl del ADN a introducir en la bacteria
  • Mezclar cuidadosamente por inmersion e incubar  en hielo por 20 min
  • Dar un choque térmico incubando a 42°C, de 30 - 60 "
  • Transferir inmediatamente a un baño de hielo por 10 min
  • Adicionar 1 ml de medio LB liquido
  • Incubar a 37 °C con agitación continua durante una hora
  • Plaquear en medio LB sólido que contiene antibiotico de selección apropiado (Kanamicina)
  • Cultivar las bacterias en caja de Petri, boca abajo, toda la noche, en incubadora a 37 °C
  • Observar directamente los resultados en las cajas de Petri
  • Determinar el número de unidades formadoras de colonia
  • Unidades Formadoras de Colonia (UFC). Unidad formadora de colonia por centimetro cuadrado. Unidades formadoras  de colonia por ml.
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