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Description
Mind Map by Natália Gabriela, updated more than 1 year ago
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Created by Natália Gabriela
about 6 years ago
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ELETROFORESE
- EM GEL DE AGAROSE
- A migração ocorre
em suportes
horizontais
- Utilizada para
separação de
fragmentos de
DNA e RNA
- Separa de
acordo com a
quantidade de
pares de base
(Pb) e carga
- Gel composto por agarose em pó
e solução tampão TAE ou TBE
- MATERIAIS UTILIZADOS
- Gel de agarose
- Cuba eletroforética horizontal
- Pipetas semi-automáticas
- Fonte para eletroforese
- Tampão de corrida
- Suportes e pentes
- Microondas
- Balança de precisão
- Ladder-Kb
- Gel de agarose
- A migração ocorre
em suportes
horizontais
- CONCEITO
- É uma técnica de separação de
biomoléculas (DNA, RNA e
proteínas) baseada no seu
tamanho e carga em um GEL.
- Empregada pela primeira
vez em 1937 por Arne
Tisélius
- É uma técnica de separação de
biomoléculas (DNA, RNA e
proteínas) baseada no seu
tamanho e carga em um GEL.
- FUNÇÃO
- Biomoléculas possuem carga, portanto, estas são
submetidas a um sistema de polos negativo e
positivo, aplicando-se uma corrente elétrica. De
acordo com sua carga, a molécula migrará para um
dos polos. Se a sua carga for negativa, migrará
para o polo positivo.
- Moléculas maiores percorrerão menores distâncias
por terem mais dificuldade de passar através do
gel, enquanto moléculas menores percorrerão
maiores distâncias, pois elas tem mais facilidade.
- Baseia-se na migração de moléculas com
cargas, que migram para os polos (negativo ou
positivo) em um sistema em que foi submetido
um potencial elétrico.
- Os géis são uma espécie de malha com
poros, que prendem as moléculas durante a
migração. As moléculas de menores
tamanhos terão maior facilidade de passar
por eles e as maiores, mais dificuldade
- O tamanho das moléculas, ao
final da migração, são
reconhecidos comparando com
marcadores, moléculas de
tamanhos específicos já
conhecidos.
- Para saber onde as moléculas estão e suas distâncias percorridas, é
adicionado um corante que fará com que as moléculas 'brilhem" quando
expostas à luz UV.
- Biomoléculas possuem carga, portanto, estas são
submetidas a um sistema de polos negativo e
positivo, aplicando-se uma corrente elétrica. De
acordo com sua carga, a molécula migrará para um
dos polos. Se a sua carga for negativa, migrará
para o polo positivo.
- EM GEL DE POLIACRILAMIDA
- Amplamente utilizada
para separação de
proteínas
- A migração ocorre
em suportes
verticais
- Separa de acordo com
a massa molecular (M.M)
e carga
- MATERIAIS UTLIZADOS
- Cuba eletroforética vertical
- Placas de vidro
- Separadores
- Grampos e pentes
- Pipetas semi-automáticas
- Acrilamida 40%, APS 10%, TMED, TBE 10X
- Se faz 2 Géis de poliacrialmida
- Gel de corrida
(poliacrilamida 8% a
20%)
- Gel de empacotamento
(poliacrilamida 5%)
- Gel de corrida
(poliacrilamida 8% a
20%)
- Se faz 2 Géis de poliacrialmida
- Tampão de corrida
- Cuba eletroforética vertical
- Amplamente utilizada
para separação de
proteínas
- IMPORTÂNCIA
- Papel importante em análises laboratóriais
- Auxilia estudos forenses
- Grande importância em elaborações
de pesquisas científicas
- Papel importante em análises laboratóriais
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