Lisis por ruptura mecánica y
extracción con disolventes
orgánicos
Lisado y purificación con un
detergente iónico. Método del CTAB
Método de salting-out
A partir de un lisado celular se
pueden separar las moléculas de
proteínas y otros contaminantes
del ADN mediante la adición de
altas concentraciones de sal que
hacen que disminuya la
solubilidad de las moléculas
orgánicas en la fase acuosa.
Método de extracción de ADN con
yoduro de sodio como agente
caotrópico en un único tubo
Técnicas de
ampliación de ADN
qPcr multiplex
Es una variante de la PCR donde
se amplifican de forma
simultánea en el mismo tubo,
distintas secuencias específicas
qPCR
La PCR de tiempo real o
cuantitativa, es una variante que
se utiliza para cuantificar la
amplificación de una secuencia
de DNA o mRNA de una muestra
RT-PCR
La PCR con retrotranscriptasa es
una variante de la PCR diseñada
para detectar y amplificar
muestras de RNA
Técnicas de
purificación de ADN
Cromatografía de
intercambio iónico
Su mecanismo básico es el
intercambio reversible de los
iones en solución con los grupos
funcionales unidos
covalentemente a una fase
estacionaria insoluble llamada
resina
Comprobación de la integridad del ADN
por electroforesis
conocer la cantidad y calidad del ADN por espectrofotometría, es importante conocer si el ADN
obtenido está integro meidnate electroforesis en gel de agarosa o poliacrilamida al 5%
Cromatografía de
permeabilidad
Separa macromoléculas
disueltas por tamaño con
base en su elución desde
columnas llenas de un gel
poroso